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      如何恢復HPLC色譜柱性能?

      發布時間:2021-09-15      點擊次數:198
        大家都知道HPLC色譜柱的壽命是有限的,在使用過程中隨著時間的推移,其性能開始下降。你可以通過峰形和峰形之間的分離,柱背壓的不規律增加以及重影峰的出現來判斷HPLC色譜柱的性能出現了下降。色譜柱是昂貴的色譜耗材,平常使用完畢后需要保養。如果色譜柱真的發生了性能下降,有什么方法可以恢復呢?
       
        首先,如果色譜柱由于過載或使用不兼容的流動相而結垢,是可以恢復的,但已經損壞的色譜柱或已經過使用壽命的色譜柱無法恢復,需要更換。
       
      DSC_6889 (2)
      色譜柱還原程序如下,供大家參考:
       
        反相柱
       
        反相分離是大多數HPLC分離中使用的主要操作模式。填料主要由C18,C4,CN,NH2和苯基固定相組成。建議以水-乙腈-異丙醇-庚烷-異丙醇-乙腈-流動相的順序用10至20倍體積的溶劑洗脫
       
        正相柱(氨基,二醇,硝基,氨基固定相)
       
        用20倍體積的溶劑沖洗,按照庚烷-異丙醇-乙腈-水-異丙醇-庚烷的順序。
       
        GPC / GFC色譜柱
       
        用5倍體 積且PH值為3的0.1%磷酸鹽緩沖液沖洗。如果使用了保留力強的蛋白質,則使用從水到乙腈再到水的60分鐘梯度液沖洗。
       
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        色譜柱在使用前都要對其性能進行考察,使用期間或放置一段時間后也要重新檢查,并將結果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。柱性能指標包括在一定實驗條件下(樣品、流動相、流速、溫度)下的柱壓、理論塔板高度和塔板數、對稱因子、容量因子和選擇性因子的重復性,或分離度。進行柱效比較時,還要注意柱外效應是否有變化。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是最佳條件),只有這樣,測得的結果才有可比性。
       
        恒譜生色譜柱柱管由不銹鋼制成,不銹鋼柱內壁多經過拋光,減小管壁效應,提高柱效,柱中填充鍵合硅膠或聚合物填料。色譜柱基于高純硅膠,采用獨特鍵合技術,具有優異的峰形,靈敏性好?;|金屬含量低,對所有類型的分析物均表現完好峰形。機械強度高,穩定性好,質控嚴格,確保色譜柱性能和色譜柱的使用壽命。有多種尺寸規格可供選擇以適應色譜工作者及其使用的不同需求。我們有專業的技術工程師團隊為您的需求提供解決方案,歡迎前來咨詢了解!
       
      液相色譜柱-DSC_7740
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